细胞名称H-4-II-E [H4-II-E](大鼠肝细胞瘤)

种属大鼠

年龄(性别)

组织来源

生长特性贴壁

细胞形态上皮细胞样

背景描述H-4-II-E [H4-II-E]细胞可诱导产生芳香烃羟化酶，用于检测环境样品或食物提取物种皮克级的多氯联苯有机化合物。

生长培养基MEM)+10% FBS+1% P/S

培养条件气相：空气，95%;CO2.5%温度：37℃

大鼠肝细胞瘤当重要的培养污染时，研究者可能试图消除或控制污染。首先，确定污染物是细菌、真菌、支原体或酵母，把污染细胞与其它细胞系隔离开，用实验室消毒剂消毒培养器皿和超净台，检查HEPA过滤器。

高浓度的抗生素和抗霉菌素可能对一些细胞系有毒性，因而，做剂量反应实验确定抗生素和抗霉菌素产生毒性的剂量水平。这点在使用抗生素如*和抗霉菌素如泰乐菌素时尤其重要。下面是*的确定毒性水平和消除培养污染的实验步骤。

1 在无抗生素的培养基中消化、计数和稀释细胞，稀释到常规细胞传代的浓度。

2 分散细胞悬液到多孔培养板中，或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内，把选择抗生素加入到每一个孔中。例如，**下列浓度，0.25.0.50.1.0.2.0.4.0.8.0 mg/ml。

3 每天观测细胞毒性指标，如脱落，出现空泡，汇合度下降和变圆。

4 确定抗生素毒性水平后，使用低于毒性浓度2-3倍浓度的抗生素的培养液培养细胞2-3代。

5 在无抗生素的培养基中培养细胞一代。

6 重复步骤4.

7 在无抗生素的培养基中培养4-6代，确定污染是否以已被消除。

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