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HS 683 人脑胶质瘤细胞 培养传代信息介绍

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所在地区:湖北 时间:2024-03-26【加入收藏夹】【关闭

货源介绍

细胞介绍

HS 683细胞源自76岁白人男性的左颞叶侧胶质瘤组织。HS 683细胞有微绒毛,无桥粒。HS 683细胞可以用于3D细胞培养、癌症研究、神经科学研究。

基本信息

细胞别称:Hs 683;HS-683;Hs-683;Hs683;

HS683;Hs 683.T;HS 683T;Hs683T

细胞来源:脑;左颞叶

细胞形态:成纤维细胞样

生长特性:贴壁生长

安全等级:BSL1

包装规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

推荐换液:2~3次/周

传代比例:1:2-1:4

倍增时间:~49-96 hours

保藏机构:ATCC;HTB-138

培养保存

培养体系:DMEM(TM055)+10%FBS(TS500)

培养条件:气相:空气,95%;CO2.5%;温度:37℃

冻存条件:基础培养基+5%DMSO+40%FBS(TS500),液氮保存

传代步骤

如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次;

加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化;

按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀;

收到细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1:2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中,建议冻存一支备用,后续传代根据实际情况按1:2到1:4的比例进行。

冻存步骤

细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数;

4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为5%,细胞密度不低于1x10(6)/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识;

将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

细胞用途

仅供科研使用。

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